封片故障 | 直接诱因 | 对标本的影响 |
视野大量气泡 | 滴胶量不足、盖玻片垂直下压 | 遮挡观测区域,无法完成高倍成像 |
玻片白雾、雾状浑浊 | 脱水不完全,残留水分进入封固层 | 标本逐步褪色,无法长期保存 |
盖玻片滑移脱落 | 封固剂用量过少、未充分固化就挪动玻片 | 标本移位撕裂,玻片彻底失效 |
高倍镜成像模糊 | 盖玻片厚度偏离 0.17mm 标准 | 产生球差,高 NA 物镜清晰度大幅下降 |
HE 染色结束之后,依次经过梯度乙醇充分脱水,最后两次无水乙醇必须保证试剂有效,含水量过高需要及时更换;
脱水完成转入二甲苯透明,透明不充分的标本,中性树胶无法浸润组织内部;透明时间不宜过长,避免组织收缩脆化;
载玻片、盖玻片选用 GB/T 44276.1‑2024 规定规格,盖玻片优先选用 0.17mm 标准厚度,来源:全国标准信息公共服务平台,https://openstd.samr.gov.cn,2024‑08‑23,裸手禁止触碰观测光学面。
玻片从二甲苯取出后,尽量控去多余透明剂,不要完全晾干,防止标本干缩;
在标本区域滴加适量中性树胶,胶滴大小以盖玻片覆盖之后刚好轻微溢出边缘为宜;胶量过少易气泡脱落,胶量过多会溢出污染玻片背面;
盖玻片倾斜 45°,一侧先接触胶滴,缓慢下放,依靠浸润作用向另一侧铺开,以此排出内部气泡,禁止垂直扣压盖玻片;
盖放完成,禁止大力按压,避免组织挤压变形;玻片水平放置于无尘避光环境自然固化;室温条件中性树胶完全固化需要 7‑14 天,固化完成再进行堆叠存放。
固化未完成的玻片,不可叠放,避免盖玻片滑移;
标本盒竖直存放,盖玻片朝上;环境温度不高于 40℃,相对湿度控制≤50%,避光远离阳光直射,来源:JY67‑82,2006‑09‑12;
建立玻片台账,记录标本编号、封片日期,定期抽检,发现霉雾、黄变及时备份;病理类玻片遵循对应档案管理规范执行保存周期。